Фреска расположена на стене монастырской трапезной, которая представляет собой перекрытое сводами прямоугольное помещение с белыми стенами, и имеет размеры 4,5 м в высоту и 8,6 м в ширину. Фреска занимает всю длину торцевой стены, ее нижний край находится на высоте более 2 м от пола.

      По мере приближения вошедший все сильнее чувствует огромные масштабы фрески и изображенных на ней фигур – каждая размером почти в два человеческих роста. Двенадцать апостолов и Спаситель изображены сидящими по одну сторону длинного стола в тот момент, когда Христос произносит фразу: «Один из вас предаст меня». В одной из фигур по правую руку от Христа безошибочно узнается лицо предателя Иуды. Жесты и мимика апостолов, пораженных услышанным, выражают сложную гамму чувств. Отшатнулся от учителя и печально поник Иоанн, отпрянул пораженный Иаков Старший. Их движения выдают то первое потрясение, когда человек еще не в состоянии разобраться в случившемся. Апостол Варфоломей стремительно приподнялся со своего места, весь подавшись вперед. Тревогой и преданностью исполнен взгляд юного Филиппа, обращенный ко Христу: «Если тебе грозит опасность, то пусть она обрушится на меня!» Грозно поднявшийся Петр готов обрушить возмездие на неведомого предателя. Сам предатель сидит вместе с другими; тень окутывает его черты.

      Центром этой напряженной композиции является спокойный образ Иисуса. Его окружает совсем иная эмоциональная атмосфера. Он свободен, потому что сам решает свою судьбу. Он не удостаивает взглядом отшатнувшегося в страхе Иуду и не хочет ответить на вопросы учеников. В мудром спокойствии Христа сочетаются оттенок бестрепетности перед неизбежным и в то же время власть над ним.