HPLC optimal einsetzen. Группа авторов
Читать онлайн книгу.
An dieser Stelle sei nun abschließend empfohlen, die injizierten wässrigen Proben in nur geringem Volumen zu injizieren oder vor Auftreffen auf die Säule mit mobiler Phase (z. B. mittels FEED Injektor) zu durchmischen oder aber in einer seriellen RPLC-HILIC-Kopplung auf die RPLC-Säule aufzugeben [18].
Kurze Zusammenfassung zur Methodenoptimierung in HILIC
Ermöglichen die zu analysierenden Moleküle aufgrund ihrer physikochemischen Eigenschaften eine Trennung mittels HILIC, so sollte man die stationäre Phase mit Sorgfalt auswählen und dann im Anschluss die mobile Phase schrittweise optimieren. Die elektrostatischen Wechselwirkungsmöglichkeiten einiger stationärer Phasen lassen die Trennung zunächst komplizierter erscheinen, aber auch dieses kann man in Hinblick auf die zu trennenden Substanzen sehr gut einschätzen und nutzen.
Es gilt an diesem Punkt noch mal zu erwähnen, dass die Zusammensetzung der mobilen Phase insgesamt einen größeren Einfluss auf die Retentionszeit hat als die anderen Parameter. Also auch abschließend bleibt die Reihenfolge für die HILIC- Methodenoptimierung (in Kombination mit massenspektrometrischer Detektion) folgendermaßen erhalten:
1 I. Stationäre Phase
2 II. Mobile Phase mita) Organischem Laufmittelb) Salzenc) pH-Wert
3 III. Weitere Einstellungen bzw. Bedingungen speziell für massenspektrometrische Detektion
Literatur
1 Alpert, A.J. (1990). Hydrophilic-interaction chromatography for the separation of peptides nucleic acids, other polar compounds. J. Chromatogr. 499: 177–196.
2 Bieber, S., Döteberg, H.-G., Greco, G., Kromidas, S. und Letzel, T. (2016). HPLC-Tipps Band 3: Gradient, HILIC, SFC und Trends in der HPLC, (Hrsg. S. Kromidas), Pirrot-Verlag, ISBN 9783-937436-58-6.
3 ChemAxon (2020) log D predictor; https://disco.chemaxon.com/calculators/demo/plugins/logdzuletzt20.05.2020.
4 PubChem (2020) https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/135#section=Decomposition zuletzt 20.05.2020.
5 Letzel, T. (2019). Spezifika der Gradientenelution in der HILIC, In: Der Gradient in der HPLC für Anwender: RP, LC-MS, Ionenanalytik, Biochromatographie, SFC, HILIC. (Hrsg. S. Kro- midas), 1. Auflage, S. 197–203. Wiley-VCH; ISBN-10: 3527344047.
6 Greco, G. und Letzel, T. (2013). Main interactions and influences of the chromatographic parameters in HILIC separations. J. Chromatogr. Sci. 51 (7): 684–693.
7 Buszewski, B. und Noga, S. (2012). Hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) – A powerful separation technique. Anal. Bioanal. Chem. 402 (1): 231–247.
8 Nováková, L., Havltková, L. und Vlčko-vá, H. (2014). Hydrophilic interaction chromatography of polar and ionizable compounds by UHPLC. TrAC Trends Anal. Chem. 63: 55–64.
9 Guo, Y. (2015). Recent progress in the fundamental understanding of hydrophilic interaction chromatography (HILIC). Analyst 140 (19): 6452–6466.
10 Alpert, A.J. (2018). Effect of salts on retention in hydrophilic interaction chromatography. J. Chromatogr. A 1538: 45–53.
11 Jandera, P. (2011). Stationary and mobile phases in hydrophilic interaction chromatography: A review. Anal. Chim. Acta 692: 1–25.
12 Guerrasio, R., Haberhauer-Troyer, C., Mattanovich, D. et al. (2014). Metabolic profiling of amino acids in cellular samples via zwitterionic sub-2 μm particle size HILIC-MS/MS and a uniformly 13C labeled internal standard. Anal. Bioanal. Chem. 406: 915–922.
13 Tang, D.-Q., Li, Z., Xiao-Xing, Y., Choon, N.O. (2016). HILIC-MS for metabolomics: An attractive and complementary approach to RPLC-MS (Review). Mass Spectrom. Rev. 35: 574–600.
14 King, A.M., Mullin L.G., Wilson, I.D. et al. (2019). Development of a rapid profiling method for the analysis of polar analytes in urine using HILIC-MS and ion mobility enabled HILIC-MS. Metabolomics 15: 17.
15 Kahsay, G., Song, H., Van Schepdael, A., Cabooter, D. und Adams E. (2014). Hydrophilic interaction chromatography (HILIC) in the analysis of antibiotics. J. Pharm. Biomed. Anal. 87: 142–154.
16 Lange, M. und Fedorova, M. (2020). Evaluation of lipid quantification accuracy using HILIC and RPLC MS on the example of NIST® SRM® 1950 metabolites in human plasma. Anal. Bioanal. Chem. 412: 3573–3584.
17 Machairas, G., Panderi, I. und Geballa- Koukoula, A. (2018). Development and validation of a hydrophilic interaction liquid chromatography method for the quantitation of impurities in fixed-dose combination tablets containing rosuvastatin and metformin. Talanta 183:131–141.
18 Bieber, S., Greco, G., Grosse, S. und Letzel, T. (2017). RPLC-HILIC and SFC with mass spectrometry: polarity-extended organic molecule screening in environmental (water) samples. Anal. Chem. 89: 7907–7914.
19 Salas, D., Borrull, F., Fontanals, N. und Marce, R.M. (2017). Hydrophilic interaction liquid chromatography coupled to mass spectrometry-based detection to determine emerging organic contaminants in environmental samples. TrAC Trends Anal. Chem. 94: 141–149.
20 Sentkowska, A., Biesaga, M. und Pyrzynska, K. (2016). Application of hydrophilic interaction liquid chromatography for the quantification of flavonoids in Genista tinctoria extract. J. Anal. Methods Chem. Vol. 3789348, https://dx.doi.org/10.1155/2016/3789348.
21 Shu, Q., Li, M., Shu, L. et al. (2020). Large-scale identification of N-linked intact glycopeptides in human serum using HILIC enrichment and spectral library search. Molec. Cell. Proteom. 19 (4): 672–689.
22 Fekete, S. und Guillarme, D. (2014). Ultra-high-performance liquid chromatography for the characterization of therapeutic proteins. TrAC Trends Anal. Chem. 63: 76–84.
23 Camperi, J., Combés, A., Fournier, T. et al. (2020). Analysis of the human chorionic gonadotropin protein at the intact level by HILIC-MS and comparison with RPLC-MS. Anal. Bioanal. Chem. 412: 4423–4432 https://doi.org/10.1007/s00216-020-02684-8.
24 Schulze, B., Bader, T., Seitz, W. et al. (2020). Column bleed in the analysis of highly polar substances: An over looked aspect in HRMS. Anal. Bioanal. Chem. 412: 4837–4847, https://doi.org/10.1007/s00216-020-02387-0.
25 Mueller, K., Zahn, D., Froemel, T. et al. (2020). Matrix effects in the analysis of polar organic water contaminants with HILIC-ESI-MS. Anal. Bioanal. Chem. 412: 4867–4879 https://doi.org/10.1007/s00216-020-02548-1.
26 Boulard, L., Dierkes, G. und Ternes, T. (2018). Utilization of large volume zwitterionic hydrophilic interaction liquid chromatography for the analysis of polar pharmaceuticals in aqueous environmental samples: Benefits and limitations. J. Chromatogr. A 1535: 27–43.
3
Optimierungsstrategien in der LC-MS-Methodenentwicklung